Cómo contar bacterias con un hemocitómetro

Escrito por elyse james | Traducido por mariela rebelo
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Cómo contar bacterias con un hemocitómetro
Evita usar objetivos de alta potencia en combinación con un hemocitómetro ya que la cámara de conteo es gruesa. (Jupiterimages/Photos.com/Getty Images)

En biología, un hemocitómetro es usado para determinar la concentración de células en suspención. Estos aparatos fueron originalmente desarrollados para realizar análisis de sangre, son un tipo de cámara de conteo que determina el número de células por unidad de volumen en suspensión. Esto puede ser usado para contar casi cualquier tipo celular, incluyendo bacterias. El hemocitómetro es usado en combinación con un microscopio para contar el número de células que aparecen en una grilla.

Nivel de dificultad:
Difícil

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Necesitarás

  • Papel de lente
  • Hemocitómetro
  • Suspención de bacterias
  • Pipeta

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Instrucciones

  1. 1

    Limpia la superficie espejada del interior del hemocitómetro usando una hoja de papel de lente. También, limpia el cobertor de la misma manera. Una vez limpio, colócalo dentro de la cámara, sobre la superficie de conteo.

  2. 2

    Diluye la suspención lo suficiente como para que las partículas no se superpongan y arruinen la cuenta.

  3. 3

    Reune una cantidad de solución con una pipeta y aprieta la suspención en forma de V de manera que la superficie espejada esté levemente cubierta por la suspención.

  4. 4

    Coloca la cámara de conteo en el microscopio y luego ajústalo para hacer foco sobre la grilla. Luego, ajusta la magnificación para reconocer el tipo de bacteria que estás observando.

  5. 5

    Cuenta el número de células bacterianas en cada grilla. Deberás desarrollar tu propio patrón de conteo basándote en el tamaño de las células. Si son grandes, cuenta el número en los cuatro cuadros de las esquinas, más el central.

  6. 6

    Determina la concentración de células en suspensión. Así, digamos que has contado 200 células en cinco cuadros principales. Cada cuadro que contaste tiene un volumen de 0.004 mm cúbicos, entonces si contaste cinco cuadros, el volumen combinado es de 0.02 mm cúbicos.

  7. 7

    Divide el número de células que contaste por el volumen total de los cuadros. De esta forma, si contaste 200 partículas en un volumen de 0.002 milímetros cúbicos, la conentración será de 200/0.02, que es igual a 10000 células por mm cúbico.

  8. 8

    Multiplica el volumen resultante por 1000, ya que hay 1000 milímetros cúbicos en un centímetro cúbico, que es lo mismo que un milímetro. Entonces, la concentración resultante será de 10 millones de células por milímetro.

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