Salud

Cómo obtener una solución buffer óptima usando un medidor de pH

Escrito por daniel r. robichaud | Traducido por luciano ariel castro
Cómo obtener una solución buffer óptima usando un medidor de pH

Hacer soluciones óptimas de amortiguamiento requiere un medidor de pH.

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Los procedimientos de química y bioquímica a menudo dependen de reacciones llevadas a cabo a un pH específico. Tales reacciones se benefician de la utilización de una solución amortiguadora, o buffer, que es un compuesto cuantificado por su resistencia a los cambios de pH cuando se añaden ácidos o bases fuertes. La realización de estos procedimientos requiere una comprensión de las soluciones buffer, así como de la calibración y el uso de medidores de pH.

Nivel de dificultad:
Moderado

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Necesitarás

  • Solución buffer de sales
  • Vaso de precipitados de 1 litro
  • 1 litro de agua destilada
  • Placa de agitación
  • Barra de agitación
  • Medidor de pH
  • Soluciones de calibración de pH
  • Vaso de precipitados de 100 ml
  • Micropipeta
  • Micropipetas con punta
  • Ácido clorhídrico (HCl)
  • Hidróxido de sodio (NaOH)

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Instrucciones

    Cómo obtener una solución buffer óptima usando un medidor de pH

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    Selecciona las sales de la solución buffer con el límite pH correcto para la reacción.

    Jupiterimages/liquidlibrary/Getty Images

    Selecciona las sales de la solución buffer con el límite pH correcto para la reacción. Las proteínas individuales y reacciones tienen requisitos específicos de pH. Los requisitos se indican explícitamente en el protocolo de reacción, presentado en la documentación que acompaña la proteína de muestra o registrados en volúmenes de referencia tales como el manual Handbook of Chemistry and Physics. Una solución buffer de pH óptimo debería estar tan cerca como sea posible a la unidad de pH de la reacción y nunca debe superar más o menos 1 valor de pH. Las soluciones buffer de sales están disponibles como un paquete o se pueden mezclar a partir de componentes primarios siguiendo recetas ampliamente disponibles.

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    Mezcla hasta que no haya cristales de la solución buffer visibles.

    Jack Hollingsworth/Photodisc/Getty Images

    Vierte la solución buffer en un vaso de precipitados de 1 litro. Añade 1 litro de agua destilada. Pon una barra de agitación en el vaso y coloca el vaso de precipitados sobre una placa de agitación. Activa la placa de agitación a una posición baja a media. Mezcla hasta que no haya cristales de la solución buffer visibles.

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    Coloca el vaso de 100 ml bajo la prueba del medidor de pH.

    Jack Hollingsworth/Photodisc/Getty Images

    Coloca el vaso de 100 ml bajo la prueba del medidor de pH. Limpia la aguja mediante su pulverización con agua destilada. El vaso captará la escorrentía. Calibra el medidor de pH con las soluciones de calibración. Limpia la aguja de nuevo. Desecha el contenido de escorrentía capturada en el vaso de 100 mililitros.

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    Lleva el medidor de pH para la placa de agitación y el vaso de precipitados de 1 litro.

    Jack Hollingsworth/Photodisc/Getty Images

    Lleva el medidor de pH para la placa de agitación y el vaso de precipitados de 1 litro. Introduce la aguja de prueba en la solución buffer. Pulsa el botón del medidor de pH de cálculo para determinar el pH de la solución. Si este valor es demasiado alto o bajo, la solución requiere los siguientes pasos adicionales.

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    Coloca una punta de micropipeta fresca en la micropipeta. Activa la placa de agitación a baja velocidad.

    Jupiterimages/Goodshoot/Getty Images

    Coloca una punta de micropipeta fresca en la micropipeta. Activa la placa de agitación a baja velocidad. Si el pH es demasiado alto, utiliza la micropipeta para añadir una gota a la vez de ácido clorhídrico a la solución. Permite la placa de agitación mezclar la solución y medir el pH. Repite el proceso hasta que el pH de la solución sea el valor necesario. Si el pH es demasiado bajo, repite este paso utilizando hidróxido de sodio en lugar de ácido clorhídrico.

Consejos y advertencias

  • Siempre utiliza equipo limpio para evitar la introducción de bacterias u otros contaminantes en tu solución.
  • Las reacciones a menudo requieren un pH preciso. Incluso una ligera desviación puede resultar en un experimento fallido.

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