Cómo preparar soluciones amortiguadoras

Escrito por carla boulianne | Traducido por martín emiliano vergé
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Cómo preparar soluciones amortiguadoras
Suministros de laboratorio para hacer una solución Tris amortiguadora.

Las soluciones buffer o amortiguadoras resisten los cambios de pH ya que contienen ácidos-base débiles conjugados que neutralizan los iones H+ y OH-. Las soluciones amortiguadoras consisten de ácidos o bases débiles y las sales de esos ácidos o bases. Escoger un sistema amortiguador apropiado depende de los rangos de pH a amortiguar. La mayoría de as reacciones biológicas ocurren en un rango de pH que va de 6 a 8. Los buffers de fosfato amortiguan a un rango de pH de 6,5 a 7,5. Los buffers de ácido carboxílico son útiles para un pH de 3 a 6. Los buffers de borato funcionan en un pH de 8,5 a 10. Los buffers de aminoácido como la glicina y la histidina pueden usarse en varios rangos de pH. El buffer Tris es uno de los sistemas amortiguadores más utilizados en laboratorios biológicos. En el siguiente ejemplo se utilizarán cálculos para soluciones de buffer Tris, pero la metodología se aplica de igual forma para cualquier solución amortiguadora.

Nivel de dificultad:
Moderado

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Necesitarás

  • Agua destilada
  • Base en polvo o cristales
  • Ácido clorhídrico (HCL)
  • Una pipeta graduada
  • Matraz aforado
  • Una barra magnética para agitar
  • Un calentador eléctrico para agitar
  • pH-metro con sonda
  • Una balanza
  • Una calculadora

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Instrucciones

  1. 1

    Usa la multiplicacion de la molaridad de la solución final y su volumen para determinar los moles de base requeridos. Por ejemplo, si 2 litros de una solución 0,1 M son requeridos para una solución de amortiguador Tris, el número de moles de Tris requeridos es:

    0.1 moles/litros x 2 litros = 0.2 moles Tris base

  2. 2

    Calcula la masa de buffer requerida multiplicando el número de moles necesitados por el peso molecular de la base. Por ejemplo, la masa de 0.2 moles de base Tris equivale a:

    0.2 moles Tris x 121,1 g/mol Tris = 24,22 g Tris

  3. 3

    Mide la masa apropiada de base en una balanza.

  4. 4

    Disuelve la base en agua destilada usando una barra magnética para agitar y un calentador eléctrico para agitar. Disuélvela en un volumen de agua apenas menor al volumen de la solución final (959 a 975 ml por cada litro de solución final). El pH del amortiguador Tris cambia con la concentración y necesita reajustes si se usa un volumen inicial muy pequeño. También es conveniente preparar el buffer a la misma temperatura a la que será utilizado durante el ensayo o experimento, ya que el Tris posee una gran dependencia de cambios de temperatura en pH.

  5. 5

    Titula la solución acuosa de solución Tris con 1 M de ácido clorhídrico usando un medidor de pH.

  6. 6

    Lleva la solución a su volumen final usando agua destilada en un matraz aforado.

Consejos y advertencias

  • Para ahorrar tiempo cuando prepares la solución amortiguadora, puedes utilizar concentrados de buffer hechos con anterioridad al pH requerido y diluirlo hasta la molaridad y volumen deseado.
  • Prepara la solución buffer a la misma temperatura que será utilizada para evitar cambios significativos en el pH.
  • Evita ajustes de pH que consuman demasiado tiempo, titula sólo después de diluir a la concentración deseada. Disolver en un volumen muy pequeño conllevará más titulaciones.
  • Ten cuidado cuando manipules los ácidos y bases.
  • Utiliza gafas de protección.

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