Cómo hacer la prueba de inhibición de la aglutinación en látex para GCH

Escrito por erin watson-price | Traducido por mar bradshaw
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Cómo hacer la prueba de inhibición de la aglutinación en látex para GCH
Investiga la presencia de GCH en una muestra de orina por aglutinación de látex. (John Foxx/Stockbyte/Getty Images)

Originalmente, las pruebas de embarazo involucraban la inyección de la orina de una mujer supuestamente embarazada en una hembra de conejo, ratón o rana. Después de 24 a 48 horas, el animal era sacrificado y los ovarios inspeccionados para evidencias de folículos hemorrágicos que indican la presencia de gonadotropina coriónica humana (GCH) en la orina. Más tarde una prueba simple que implicaba perlas de látex recubiertas de GCH y suero anti-GCH simplificó el proceso a un mínimo de cuatro horas. Aunque este método de prueba para la presencia de GCH ya no está en uso, la ciencia detrás de la prueba de aglutinación en látex para GCH ha allanado el camino para la prueba de embarazo con base de tinte actual.

Nivel de dificultad:
Moderado

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Necesitarás

  • Muestra de orina
  • Tubo de ensayo
  • Pipeta
  • Centrífuga
  • Kit de prueba de embarazo por aglutinación de látex
  • Baño de agua caliente

Lista completaMinimizar

Instrucciones

  1. 1

    Obtén una muestra de orina de la paciente temprano por la mañana, preferiblemente la primera orina de la mañana.

  2. 2

    Comienza evaluando la muestra dentro de las 12 horas. Después de 12 horas, la GCH se degrada y la muestra ya no proporciona un resultado fiable.

  3. 3

    Centrifuga la muestra de orina a 3.000 rpm durante tres minutos.

  4. 4

    Extrae la capa sobrenadante, o la parte superior de la muestra de orina, y combina con el anti-suero de GCH. Las cantidades exactas de cada uno dependerán del kit utilizado. El suero anti-GCH puede ser de conejo, humano o ratón.

  5. 5

    Mezcla la orina y el suero anti-HCG a fondo.

  6. 6

    Incuba el tubo de ensayo que contiene la muestra y el antisuero durante una hora en un baño de agua a 37 grados Celsius o a la temperatura corporal. Durante la incubación, el antisuero se unirá con cualquier partícula de GCH en la muestra de orina.

  7. 7

    Quita el tubo de ensayo del baño de agua y añade la suspensión de látex revestido con GCH al tubo de ensayo. Una vez más, la cantidad dependerá del kit utilizado. Sacude la suspensión antes de tomar la muestra para asegurar la extracción de una cantidad exacta.

  8. 8

    Mezcla la muestra y la suspensión de látex bien e incuba de nuevo en el baño de agua durante dos horas.

  9. 9

    Quita el tubo de ensayo del baño de agua.

  10. 10

    Centrifuga el tubo de ensayo a 3000 rpm durante dos minutos.

  11. 11

    Quita el tubo de ensayo de la centrífuga y compara su aspecto con el control positivo suministrado con el kit de prueba. Un tubo de ensayo nublado indica embarazo y un tubo de ensayo claro indica ausencia de embarazo.

Consejos y advertencias

  • Cuando la GCH está presente, se une con el antisuero, inhibiendo su capacidad para unirse a las perlas de látex recubiertas de GCH y hace que se aglutinen o se peguen entre sí.
  • Cuando la GCH no está presente, el antisuero une las perlas de látex causando que precipiten en la parte inferior del tubo de ensayo.
  • El paciente no puede tomar salicilatos, por ejemplo, aspirina, durante al menos dos días antes de la prueba. Los salicilatos influyen en el enlace de la orina al antisuero provocando un falso positivo.

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