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Como hacer agar papa dextrosa

Escrito por philip mcintosh | Traducido por ehow contributor

Papa dextrosa agar (PDA) es un buen cultivo semisólido de uso general utilizado para el cultivo de hongos. A menudo se utiliza para aislar, cultivar y mantener la formacion de especies hongos. Platos preparados de Petri o tubos de ensayo que contiene PDA se pueden comprar, o el PDA se puede hacer rápidamente utilizando una premezcla comercial. Sin embargo, no es difícil hacer una versión sencilla y eficaz desde el principio a un bajo coste.

Nivel de dificultad:
Fácil

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Necesitarás

  • 300 g patatas peladas y picadas
  • Cacerola
  • colador de cocina o gasa
  • Prueba de pH de papel o medidor de pH
  • Un molar de ácido clorhídrico
  • 1 molar de Hidróxido de sodio
  • 4 frascos de cristal de 500 ml de Ehrlenmayer (u otros recipientes de boca estrecha esterilizados)
  • 10 g de dextrosa (glucosa) en polvo
  • 20 g de agar
  • Lámina de aluminio
  • Olla a presión
  • Placas de Petri estériles

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Instrucciones

  1. 1

    Coloca las patatas en una cacerola con aproximadamente 1,2 litros de agua del grifo y deja hervir durante 1 hora.

  2. 2

    Retira la olla del fuego y deja enfriar el líquido hasta que pueda ser manejado cómodamente (unos 10 minutos).

  3. 3

    Vierte el extracto de patata líquido a través de un colador o una gasa y recógela en otro recipiente.

  1. 1

    Añade dextrosa y agar en 1 litro de agua de extracto de patata.

  2. 2

    Prueba el pH de la solución con un test de pH de papel o un medidor de pH.

  3. 3

    Si el pH está por encima de 6,5, se debe ajustar añadiendo una gota de la solución de ácido clorhídrico y volver a probar.

  4. 4

    Si el pH es inferior a 6, se ajustará hacia arriba añadiendo una gota de la solución de hidróxido de sodio y volver a probar.

  1. 1

    Mezcla bien el cultivo y dividirlo en lotes más pequeños de 250 ml. Viertelo en los cuatro matraces de 500 ml (Nota: no se debe llenar más de la mitad de cada frasco para evitar que salga en la ebullición).

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    Cubre cada frasco con un pedazo de papel de aluminio ligeramente ondulado, para que el papel no se caiga, pero tampoco haga un sello hermético.

  3. 3

    Coloca los frascos en una olla a presión.

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    Opera la olla a presión de acuerdo con las instrucciones del fabricante para esterilizar el PDA a 121 grados centigrados(250 grados F) a una presión de 103.421 pascales (15 psi) durante 15 minutos.

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    Apaga la olla a presión y deja que retorne a la presión atmosférica, a continuación, retira los frascos y deja enfriar hasta que puedan ser manipulados.

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    Alinea las placas de Petri estériles sobre una superficie plana.

  2. 2

    Una vez que los frascos se han enfriado a la temperatura de tratamiento, pero antes de que el cultivo empiece a solidificarse, toma un frasco con una mano y quita y deja a un lado su tapa de papel con la otra mano.

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    Para cada placa de Petri, levanta la tapa con una mano, rápidamente llénala hasta la mitad con PDA líquido y vuelve a colocar la tapa.

  4. 4

    Repite el paso 3 hasta que todas las placas de petri estén llenas.

  5. 5

    Si sobra algo de PDA, sin apretar poner la tapa de alumnio original en el frasco, deja que se enfríe y solidifique, aprieta la tapa de aluminio y guardar en el refrigerador.

Consejos y advertencias

  • La mayoría de los hongos se encuentran bien en condiciones ligeramente ácidas, por lo que el pH final debe estar entre 6 y 6,5, aunque se puede ajustar al pH que sea necesario para una determinada especie.
  • Mantenga las tapas de caja de Petri abiertas lo suficiente para permitir a medio y verter en la cubierta y lo más rápidamente posible.
  • Se necesita algo de práctica para ganar velocidad y eficiencia en verter el agar en las placas de Petri.
  • Después del enfriamiento y la solidificación, las placas de PDA pueden ser envueltas en plástico y almacenadas en un refrigerador durante meses.
  • El agua del grifo contiene minerales beneficiosos para el crecimiento de hongos, sin embargo, si el agua local posee una concentración extrema de minerales o tiene un pH muy alto o bajo, sustituirla por agua destilada.
  • Sigue todas las instrucciones de funcionamiento y de seguridad para el modelo de la olla a presión que se utiliza
  • Deja la tapa de las botellas abierta cuando esterilices en la olla a presión para evitar un aumento de la presión.
  • Usa guantes resistentes al calor cuando manejes contenedores calientes.
  • Usa gafas de seguridad cuando operes con la olla a presión, cuando retires el pda esterilizado y durante el vertido.

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