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Como hacer agar de patata y dextrosa

Escrito por philip mcintosh | Traducido por ehow contributor
Como hacer agar de patata y dextrosa

El agar de patata y dextrosa (PDA por sus siglas en inglés) es un buen medio semisólido de uso general utilizado para el cultivo de hongos.

Ryan McVay/Photodisc/Getty Images

El agar de patata y dextrosa (PDA por sus siglas en inglés) es un buen medio semisólido de uso general utilizado para el cultivo de hongos. A menudo se utiliza para aislar, cultivar y mantener la formación de hongos. Se pueden comprar placas de Petri preparadas o tubos de ensayo que contienen PDA o el PDA se puede hacer rápidamente utilizando un preparado comercial. Sin embargo, no es difícil hacer una versión sencilla y eficaz desde el principio a un bajo coste.

Nivel de dificultad:
Fácil

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Necesitarás

  • 300 g de patatas peladas y picadas
  • Una cacerola
  • Un colador de cocina o una gasa
  • Una prueba de pH de papel o un medidor de pH
  • 1 molar de ácido clorhídrico
  • 1 molar de Hidróxido de sodio
  • 4 frascos de cristal de 500 ml de Ehrlenmayer (u otros recipientes de boca estrecha esterilizados)
  • 10 g de dextrosa (glucosa) en polvo
  • 20 g de agar
  • Una lámina de aluminio
  • Una olla a presión
  • Placas de Petri estériles

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Instrucciones

    Preparando el extracto de patata

  1. 1

    Coloca las patatas en una cacerola con aproximadamente 1,2 litros de agua del grifo y deja hervir durante 1 hora.

  2. 2

    Retira la olla del fuego y deja enfriar el líquido hasta que pueda ser manejado cómodamente (unos 10 minutos).

  3. 3

    Vierte el extracto de patata líquido a través de un colador o una gasa y recógelo en otro recipiente.

    Preparando el medio

  1. 1

    Añade dextrosa y agar a 1 litro de agua de extracto de patata.

  2. 2

    Prueba el pH de la solución con un test de pH de papel o un medidor de pH.

  3. 3

    Si el pH está por encima de 6,5 se debe ajustar añadiendo una gota de la solución de ácido clorhídrico y volver a probar.

  4. 4

    Si el pH es inferior a 6, se ajustará hacia arriba añadiendo una gota de la solución de hidróxido de sodio y se vuelve a probar.

    Esterilización

  1. 1

    Mezcla bien el cultivo y divídelo en lotes más pequeños de 250 ml. Viértelo en los cuatro matraces de 500 ml (Nota: no se debe llenar más de la mitad de cada frasco para evitar que salga en la ebullición).

  2. 2

    Cubre cada frasco con un trozo de papel de aluminio ligeramente ondulado, para que el papel no se caiga, pero tampoco hagas un sello hermético.

  3. 3

    Coloca los frascos en una olla a presión.

  4. 4

    Opera la olla a presión de acuerdo con las instrucciones del fabricante para esterilizar el PDA a 121 grados centigrados (250 grados F) a una presión de 103.421 pascales (15 psi) durante 15 minutos.

  5. 5

    Apaga la olla a presión y deja que retorne a la presión atmosférica; a continuación, retira los frascos y deja que se enfríen hasta que puedan ser manipulados.

    Vertiendo el medio

  1. 1

    Alinea las placas de Petri estériles sobre una superficie plana.

  2. 2

    Una vez que los frascos se han enfriado a la temperatura de tratamiento, pero antes de que el cultivo empiece a solidificarse, toma un frasco con una mano y quita y deja a un lado su tapa de papel con la otra.

  3. 3

    Para cada placa de Petri, levanta la tapa con una mano, rápidamente llénala hasta la mitad con PDA líquido y vuelve a colocar la tapa.

  4. 4

    Repite el paso 3 hasta que todas las placas de petri estén llenas.

  5. 5

    Si sobra algo de PDA, sin apretar pon la tapa de aluminio original en el frasco, deja que se enfríe y solidifique, aprieta la tapa de aluminio y guárdalo en el refrigerador.

Consejos y advertencias

  • La mayoría de los hongos se encuentran bien en condiciones ligeramente ácidas, por lo que el pH final debe estar entre 6 y 6,5, aunque se puede ajustar al pH que sea necesario para una determinada especie.
  • Mantén las tapas de caja de Petri abiertas lo suficiente como para permitir el vertido del medio y vuelve a colocarla lo más rápidamente posible.
  • Se necesita algo de práctica para ganar velocidad y eficiencia en verter el agar en las placas de Petri.
  • Después del enfriamiento y la solidificación, las placas de PDA pueden ser envueltas en plástico y almacenadas en un refrigerador durante meses.
  • El agua del grifo contiene minerales beneficiosos para el crecimiento de hongos; sin embargo, si el agua local posee una concentración extrema de minerales o tiene un pH muy alto o bajo, sustitúyela por agua destilada.
  • Sigue todas las instrucciones de funcionamiento y de seguridad para el modelo de la olla a presión que se utiliza.
  • Deja la tapa de las botellas abiertas cuando esterilices en la olla a presión para evitar un aumento de la presión.
  • Usa guantes resistentes al calor cuando manipules contenedores calientes.
  • Usa gafas de seguridad cuando operes la olla a presión, cuando retires el PDA esterilizado y durante el vertido.

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